C18液相色谱柱的操作方法

　　C18液相色谱柱用于分离样品，是整个色谱系统的心脏。其质量直接影响分离效果，检测器将连续流动的样品组分转换为易于测量的电信号，由数据系统接收，以获得样品分离的色谱图。记录仪或数据工作站对色谱数据进行处理，参与HPLC仪器的自动控制。随着技术的日益成熟和性能的不断提高，它已成为分离复杂多组分混合物和多项目分析的主要方法，在各个领域有很大的取代填充柱的趋势。
 

　　今天给大家分享一下C18液相色谱柱的操作方法：
 

　　1、有条件的情况下，新产品使用前按人工方法进行柱效测试，确保正常。
 

　　2、工作温度应低于60℃。
 

　　3.将样品溶解在流动相或极性相近的溶剂中。如果使用梯度洗脱，样品需要溶解在原始流动相或类似极性的溶剂中。样品溶液不应含有任何颗粒物，应使用粒径为0.5μm或更小的过滤器进行过滤。如果样品溶液中使用了强溶剂，为了获得更好的峰形，需要减少进样量。
 

　　4、所有流动相，尤其是含有缓冲盐的流动相，应在实验当天准备好；如果使用前一天配制的流动相，请确保流动相的pH值不发生变化，且流动相不会滋生细菌。流动相的pH值取决于您的应用和色谱柱填料的类型。
 

　　当复杂的样品溶液通过吸附剂时，吸附剂通过极性相互作用、疏水相互作用或离子交换选择性地保留目标物和少量与目标物性质相似的组分，而其他组分穿透吸附剂流出小柱，再用另一种溶剂体系选择性洗脱目标化合物，从而实现复杂样品的分离、纯化和富集。在固相萃取过程中，“保留”和“洗脱”受三个因素的影响：目标、吸附剂和溶剂。对于给定的目标，选择合适的吸附剂、样品溶剂和洗脱溶剂是成功分离的关键。